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凱氏定氮儀應用發展概述

更新時間:2016-06-28      點擊次數:2309
凱氏定氮法是目前分析有機化合物或混合物中含氮量常用的方法,是測定試樣中總有機氮zui準確和zui簡單的方法之一,被國內作為法定的標準檢驗方法。凱氏定氮法適用范圍廣泛,測定結果準確,重現性好,但操作復雜費時,工作量。在此形勢下,用安全、準確、可靠、省時、省力自動化程度高凱氏定氮儀行業面對國內外巨大需求有了飛速發展。

  凱氏定氮儀是依據經典凱氏定氮方法設計的自動測定系統,根據蛋白質中氮的含量恒定的原理,通過測定樣品中氮的含量從而計算蛋白質含量。該儀器安裝、操作簡單;適用于糧油檢測、飼料分析、植物養分測試、土肥檢測、環保、醫藥、化工等行業的分析、教學及研究中主要用來檢測糧食、食品、乳制品、飲料、飼料、土壤、水、藥物、沉淀物和化學品等中的氨氮、蛋白質氮等含量,是操作人員的理想工具,同時利用定氮儀也可以二氧化硫等物質,是實驗室比較重要的理化分析儀器。

  一 凱氏定氮儀主要應用方面

  1. 蛋白質測定

  國家標準方法中食品中蛋白質測定、飼料中粗蛋白質的測定及植物油料粗蛋白質的測定等;谷元蛋白粉的測定;胡思剛,劉革偉用凱氏定氮法檢測脫脂奶粉中蛋白質含量[1]、張玉葵 葉爾太的測定牛乳中蛋白質含量的方法[2]等。

  2. 氮的測定

  國家標準中乳與乳制品中非蛋白氮含量的測定、淀粉及其衍生物氮含量測定、土壤中氮含量的測定、復混肥料中總氮含量測定、肥料中銨態氮含量的測定、尿素的測定方法等;朱亞民與楊玲潔研究定氮儀測定水中氨氮[3]、譚杰和羅蜀云用定氮儀測定天然橡膠氮含量[4]、熊芳、易偉亮用自動凱氏定氮儀測定醬油中銨鹽含量[5] 等。

  3. 揮發性鹽基氮測定

  葛曉鳴等用全自動凱氏定氮儀測定金槍魚肉中揮發性鹽基氮含量[6]、呂玉瓊等用全自動定氮儀測定肉類中的揮發性鹽基氮[7]、魚粉中揮發性鹽基氮的測定[8],張建寧與吳東林用自動凱氏定氮儀測定水產品、肉及制品中的揮發性鹽基氮含量及不確定度評定[9] 等。

  4. 其它方面

  詹德江,陳曉云等用凱氏定氮儀測定水發產品中甲醛的含量[10]、陳曉云應用凱氏定氮儀測定黃花菜中二氧化硫的含量[11]、乙小娟、俞曄等用全自動凱氏定氮儀測定己內酰胺中揮發堿[12]等。

  二 凱氏定氮儀的使用注意事項

  1 樣品前處理

  樣品應盡量選取具有代表性的,大塊的固體樣品應用粉碎設備打得細小均勻,液體樣要混合均勻。

  2 模塊化消解裝置消化樣品

  消化過程中,首先確保濃硫酸量足夠,如樣品脂肪含量較高時,應適當增加硫酸量;其次對某些樣品炭化易產生泡沫,這時可采用sh520消解爐曲線升溫或手動控制升溫,讓消解溶液沸騰均勻后再提高消解溫度,直至消化液呈透明藍綠色再消化0.5h或1h。因為炭化過程中,升溫速度過快會使樣品溢出消化管或濺起粘附在管壁導致無法消化*而造成氮損失,影響結果準確性。

  3 上機測定

  儀器稀釋水采用中性去離子水;蒸汽發生瓶內的水必須保持酸性;硼酸吸收液配制時應用中性去離子水,避免堿性物質的混入,盛裝硼酸吸收液的容器應刷洗干凈;堿液應用中性去離子水配置;滴定用的標準酸必須按照標準配制和標定。

  上機測試樣品前,應打開儀器預熱,放一支消化管空蒸一次,排除蒸餾管路中的空氣。

  蒸餾時必須加堿,加入堿的作用一是中和硫酸,二是使溶液處于強堿性,這樣才能使 (NH4)2SO4變成NH3被硼酸吸收,通常是消化取用濃硫酸的四倍體積(40%NaOH)。硫酸銅可作為催化劑,并在蒸餾時作堿性反應指示劑,氫氧化鈉是否足量.可借助硫酸 銅在堿性條件下生成的褐色沉淀或深藍色的銅氨絡離子指示。若溶液的顏色不改變,則說明所加的堿液不足。

  蒸餾是否*,半自動凱氏定氮儀可用精密 pH試紙測冷凝管的冷凝液來確定,中性說明已蒸餾*。全自動凱氏定氮儀目前主要是以蒸餾體積與設置時間(經驗值)確保蒸餾*。

  蒸餾結束后,滴定主要是是分為人工滴定和機器自動滴定計算和打印實驗結果。要求操作者根據實際情況,按照要求操作。

  四 凱氏定氮儀使用的優缺點

  按照凱氏定氮原理設計的凱氏定氮儀運用化學、物理學、電學、自動控制等方面新技術采用可以批量處理樣品,簡單易于操作,對食品、農作物、肥料、土壤、水等物質中的氮、蛋白質含量進行定量測定,其結果可靠,且能夠滿足高通量檢測要求,基本能夠客觀的反映出樣品含蛋白質水平。同時還可以應用于揮發性鹽基氮,二氧化硫燈物質的測定,應用范圍廣。

  凱氏定氮法的主要缺陷是方法的特征性差,得到的測量結果只能代表樣品中所有含氮化合物的總量,不能準確表示蛋白質的含量,這是因為在消化過程中除蛋白質中的氮轉化成(NH4)2SO4外,一些非蛋白質類的含氮化合物(如生物堿、尿素、三聚氰胺等)也能轉化成 (NH4)2SO4,計算氮的含量時,認為所有的氮都來源于蛋白質,因此測定結果比實際值偏高。所以凱氏定氮儀也存在此問題。

  因此,使用凱氏定氮法這一技術的前提便是:樣品是真正的蛋白質樣品,沒有被造假。參照此前提,技術便能準確為人服務。

  五 發展

  隨著社會的進步,科學技術的發展。國內的分析儀器行業,也開始蓬勃發展起來,以前我國僅能生產半自動型,且技術含量低,可靠性差,水平落后,自動定氮儀只能依賴進口,并且價格昂貴。

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